eva‎luation of the effects of vitamin B12 and myoinositol on human sperm parameters during the freezing-thawing process

كريمي نژاد شيوا kariminezhad shiva

مروتي شريف آباد مجيد morovati sharifabad majid , بهادري محمدهادي bahadori mohammad hadi

صالحي الهام salehi elham , گلي پور زليخا golipour zoleykha

زيستشناسي جانوري- زيست شناسي سلول و تكويني

كارشناسي ارشد

پيرادامپزشكي

دامپزشكي

ويتامين ب 12 , مايواينوزيتول , اسپرم , ناباروري مردان

vitamin b12 , myoinositol , sperm , male infertility

مردان نابارور سطوح بالاتري از گونه‌هاي اكسيژن واكنشي مايع سيمن را نسبت به مردان بارور دارند. سطوح بالاي راديكال آزاد در اسپرم مي‌تواند باعث اختلال عملكرد اسپرم، آسيب DNA اسپرم و كاهش پتانسيل توليد مثل مردان شود. انجماد اسپرم به دليل نيازهاي باليني جديد اهميت زيادي دارد. علي‌رغم تاثيرات مفيدي كه دارد، همچنين مي‌تواند تغييرات مضر جدي در عملكرد اسپرم ايجاد كند. مكانيسم‌هاي آسيب سرمايي به اسپرم‌هاي انسان عبارتند از: شوك سرما، استرس اسمزي، تشكيل كريستال يخ درون سلولي، استرس اكسيداتيو و تركيبي از اين شرايط. به‌طور كلي افزودني‌هايي كه خواص آنتي‌اكسيداني از خود نشان مي‌دهند مي‌توانند تأثير آسيب‌هاي ناشي از ROS و شوك سرما را كاهش ‌دهند. درمان با مكمل‌هاي آنتي اكسيداني خوراكي و مكمل‌هاي درون آزمايشگاهي براي كشت در تكنيك‌هاي كمك باروري كاربرد زيادي دارد. در انسان‌ها ويتامين 12B از خون به اندام‌هاي تناسلي مردان منتقل مي‌شود، كه اين خود بر نقش اساسي ويتامين 12B در اسپرماتوژنز و در نتيجه اثر مطلوب بركيفيت مايع سيمن تأكيد مي‌كند.. مايواينوزيتول يك مكمل قندي از گروه خانواده ويتامين B مي‌باشد كه غلظت آن در توبول‌هاي اسپرم‌ساز از سرم بيشتر است. از اين رو اين پژوهش با هدف بررسي افزودن ويتامين 12B و مايواينوزيتول به محيط انجماد اسپرم انسان و تاثيرات آن بر پارامتر‌هاي اسپرم صورت گرفت. نمونه مايع سيمن مربوط به 20 نفر با باروري طبيعي پس از آماده سازي به 4 بخش مساوي تقسيم شد: گروه اول به عنوان گروه كنترل در نظر گرفته شد، گروه دوم دريافت كننده‌ي 2 ميلي‌گرم ويتامين 12B ، گروه سوم دريافت كننده‌ي 2 ميلي‌گرم مايواينوزيتول و گروه چهارم دريافت كننده‌ي 2 ميلي‌گرم ويتامين 12 B+2 ميلي‌گرم مايواينوزيتول. سپس به روش انجماد سريع در تانك ازت به مدت دو هفته منجمد شدند. پس از آن نمونه‌ها ذوب و شستشو گرديده و پارامترهاي اسپرم شامل تحرك، قابليت حيات، مورفولوژي، ميزان غلظت پراكسيداسيون ليپيد و ميزان غلظت ظرفيت آنتي اكسيداني تام مورد آناليز قرار گرفتند. داده‌هاي حاصل از اين پژوهش با استفاده از نرم افزارspss نسخه 23 و از طريق واريانس يكطرفه مورد بررسي قرار گرفتند و (05/0P<) در نظر گرفته شد. نتايج به دست آمده نشان داد كه تحرك اسپرم ، قابليت حيات، مورفولوژي و ميزان ظرفيت آنتي اكسيداني تام در گروه‌هاي تيمار شده با آنتي اكسيدان‌ها به طور معني داري بيشتر از گروه كنترل هستند و اين ميزان در گروه تركيب دو آنتي اكسيدان ويتامين 12 Bو مايواينوزيتول از بقيه بيشتر مي‌باشد. همچنين ميزان پراكسيداسيون ليپيدي در گروه‌هاي تيمار شده با آنتي اكسيدان ها به طور قابل توجهي كمتر از گروه كنترل مي‌باشد. يافته‌ها نشان مي‌دهد كه به دنبال افزايش TAC و كاهش MDA، كيفيت اسپرم و ميزان بهبودي پارامترهاي اسپرم افزايش مي‌يابد. بنابراين ارزيابي وضعيت اكسيداتيو مي‌تواند به عنوان ابزار مفيدي براي تشخيص و درمان ناباروري مردان به ويژه در ناباروري ايديوپاتيك باشد.

Infertile men have higher levels of reactive semen oxygen species than fertile men. High levels of free radicals in semen can cause sperm dysfunction, damage sperm DNA and reduce male reproductive potential. Sperm cryopreservation is important because of new clinical needs. Despite its beneficial effects, it can also cause serious detrimental changes in sperm function. Mechanisms of cold damage to human sperm include cold shock, osmotic stress, formation of intracellular ice crystals, oxidative stress, and a combination of these conditions. In general, additives that exhibit antioxidant properties can reduce the effects of ROS damage and cold shock. Treatment with oral antioxidant supplements and in vitro supplements for culture is widely used in assisted reproductive techniques. In humans, vitamin B12 is transported from the blood to the male reproductive organs, which in turn emphasizes the essential role of vitamin B12 in spermatogenesis and thus the desired effect on semen quality. Myoinositol is a sugar supplement from the vitamin B family group, whose concentration is higher in spermatogenic tubules than in serum.Therefore, the aim of this study was to investigate the addition of vitamin B12 and myoinositol to human sperm cryopreservation medium and its effects on sperm parameters. Cement samples from 20 people with normal fertility were divided into 4 equal parts after preparation. The first group was considered as the control group, the second group received 2 mg of vitamin B12, the third group received 2 mg of myoinositol and the fourth group received 2 mg of vitamin B12 + 2 mg of myoinositol. They were then frozen in a nitrogen tank for two weeks by rapid freezing. The samples were then thawed and washed and sperm parameters including motility, viability, morphology, lipid peroxidation and total antioxidant capacity were analyzed. The data obtained from this study were analyzed using SPSS software version 23 through one-way variance (P <0.05). The results showed that sperm motility, viability, morphology and total antioxidant capacity in the groups treated with antioxidants were significantly higher than the control group and this amount in the combination of two antioxidants vitamin B12 and myoinositol from The rest is more. Also, the rate of lipid peroxidation in the groups treated with antioxidants was significantly lower than the control group. The results show that following the increase in TAC and decrease in MDA, sperm quality and the rate of improvement of sperm parameters increase. Therefore, eva‎luation of oxidative status can be a useful tool for diagnosing and treating male infertility, especially in idiopathic infertility.

6/1/2022 12:00:00 AM

436

VM20

شيوا كريمي نژاد